| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 1491-1 | ||||
Resumo:A Coleção de Bactérias Patogênicas (CBP) é um dos acervos de pesquisa do Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS), unidade técnico-científica da Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ). A CBP possui um arsenal com mais de 2000 linhagens bacterianas e disponibiliza uma variedade de serviços, incluindo, caracterização fenotípica e molecular, depósito e preservação de linhagens bacterianas, seja por liofilização ou ultracongelamento. Além disso, fornece microrganismos autenticados para dar suporte à pesquisa científica, estudos epidemiológicos, entre outros. O objetivo desse estudo foi submeter 100 cepas do acervo da CBP aos ensaios de pureza, viabilidade e autenticação/caracterização para garantia da qualidade do material fornecido. Foram selecionadas as linhagens mais solicitadas para o fornecimento externo e, dentre essas, aquelas com estoques críticos (abaixo de 10 ampolas). A identificação fenotípica das cepas foi realizada baseada na avaliação morfotintorial através da coloração pelo método de Gram, testes bioquímicos e sistema automatizado VITEK®2 (BioMerieux). O sequenciamento parcial do gene 16S rRNA foi utilizado nos casos onde a identificação em nível de espécie não foi possível com os testes fenotípicos utilizados. O MALDI-TOF também foi utilizado a fim de comparar com os resultados de identificação do VTEK e o sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. Foram reidratadas 116 ampolas de bactérias liofilizadas, em meios de cultivo apropriados, totalizando 100 cepas do acervo da CBP. Dessas, 84 cepas apresentaram crescimento puro e compatível com a identificação na CBP, quatro apresentaram crescimento de mais de um microrganismo (contaminação) e apenas duas cepas apresentaram crescimento puro, no entanto, com características não compatíveis com a identificação na CBP. Em dez cepas não houve crescimento no primeiro cultivo pós reidratação da ampola. Uma nova ampola foi aberta e nove cepas foram recuperadas e cresceram de forma satisfatória. No ensaio de viabilidade todas as cepas avaliadas apresentaram resultado satisfatório, a maioria com 10⁸ UFC/mL de células viáveis. Foram realizadas 97 identificações pelo Vitek®2 com os seguintes resultados: 57 cepas da família Enterobacteriaceae, 15 cepas de Pseudomonas aeruginosa, nove pertencentes ao gênero Staphylococcus e nove do gênero Bacillus. Sete cepas apresentaram resultado da identificação pelo Vitek®2 diferente de sua identificação na coleção, sendo assim, excluídas do acervo. De acordo com os critérios determinados pelo Comitê Brasileiro de Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos - BrCAST foram avaliados os perfis de susceptibilidade de 78 cepas, onde 31% delas foram sensíveis a todos os antimicrobianos testados. Foram obtidos resultados satisfatórios em, aproximadamente, 70% das cepas que foram submetidas ao sequenciamento parcial do gene 16S rRNA e/ou MALDI-TOFF, com algumas divergências entre as metodologias utilizadas.
Financiamento: INCQS / FIOCRUZ Palavras-chave: bactérias, caracterização, controle de qualidade Agência de fomento:Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde – INCQS / Fiocruz | |||||